Etiología de un síndrome fungoso y viral en cladodios de nopal verdura (Opuntia ficus-indica)

Abstract

El cultivo de nopal (Opuntia ficus-indica) presenta diversas enfermedades de importancia económica asociadas a hongos y virus. Los objetivos de esta investigación fueron: a) detectar la ocurrencia de infecciones latentes del agente causal de la mancha negra, Pseudocercospora opuntiae (Po), mediante estudios histológicos y evaluar la implicación sinergética de Colletotrichum sp. (C) en la infección de P.opuntiae, y b) demostrar la naturaleza etiológica viral asociada a manchas cloróticas anulares en nopal. Con respecto al primer objetivo se evaluaron 31200 cortes histológicos provenientes de 78 cladodios sintomáticos colectados en siete fechas de muestreo comprendido en el periodo, junio-agosto, caracterizado por alta incidencia de mancha negra. Adicionalmente, en septiembre se efectuaron dos muestreos seleccionando cladodios con síntomas de mancha negra y lesiones de coloración rojiza atribuible a Colletotrichum sp. Los hongos de interés se aislaron y se emplearon en pruebas de patogenicidad en 24 cladodios sanos mediante la aspersión de 6x104 y 2x105 de P.opuntiae y Colletotrichum sp., respectivamente, en los tratamientos Po+C, Po y C. En los cortes histológicos realizados no fue posible encontrar hifas, micelio o estructuras reproductivas del hongo. Tampoco se detectaron alteraciones de los tejidos estructurales y vasculares de la planta, lo sugiere que el hongo no genera infecciones latentes. Por otro lado, en las pruebas de patogenicidad a 150 días después de inoculación (ddi) los cladodios no presentaron síntomas en ninguno de los tratamientos de Po+C, Po y C, lo cual indica que el estudio sinergético fue inconcluso. En relación al segundo objetivo se seleccionaron 50 cladodios con síntomas de halos cloróticos alrededor de areolas provenientes de Cuautepec de Hinojosa, Hidalgo. A partir del tejido sintomático se realizó la purificación parcial del putativo agente viral, microscopia electrónica, inoculación de plantas indicadoras, transmisión mecánica y rt-PCR. Adicionalmente, se evalúo la distribución espacial de incidencia y severidad en condiciones de campo para determinar el nivel de ocurrencia de la enfermedad. El purificado parcial demostró la presencia de un agente de tipo viral, este se transmitió mecánicamente a 11 plantas indicadoras. En Quenopodium quinoa causó limitada infección sistémica en nervaduras y manchas amarillas en el área internerval. El virus se transmitió exitosamente a 43% de cladodios inoculados reproduciendo halos cloróticos 7ddi y manchas cloróticas e irregulares a los 25 ddi. El análisis electroforético mostró que el virus aislado de plantas de nopal tuvo un genoma de ARN de cadena simple, mientras que al microscopio electrónico se observó un alto número de partículas virales en forma de varilla flexible. El ensayo de rt-PCR confirmó que el virus es una especie del género Potexvirus. Las características biológicas de este virus sugieren que es una variante relacionada con la especie Cactus virus X. En campo, este virus causó una incidencia de 47-60% y severidad de 51-79% con una distribución espacial claramente agregada con fuerte direccionalidad en sentido de los surcos. Este es el primer reporte de un Potexvirus en nopal verdura en México.