Rescate genético de Calibanus hookeri (LEM.) Trel.

Abstract

Calibanus hookeri sinonimia Beaucarnea hookeri, endémica de México y con categoría de riesgo amenazada (NOM-059-SEMARNAT-2010), su morfología que lo distingue es su caudex, de corteza fisurada color marrón grisáceo, hojas dispuestas en roseta casi sésiles distribuidas en el caudex dando una apariencia cespitosa. Se encuentra en lugares muy localizados y en poblaciones con pocos individuos. Por lo que, ante esta situación, la propagación in vitro es una opción para la satisfacer la demanda en el mercado hortícola, pero también para diseñar programas de reintroducción, contribuyendo a su conservación. Existen protocolos para propagar los géneros Beaucarnea, Dasylirion, Nolina y C. hookeri mediante organogénesis directa en medio MS, suplementado con varias citocininas a altas concentraciones, pero no se ha estudiado el subcultivo de esta especie. El objetivo del presente trabajo fue generar un protocolo de subcultivo in vitro para C. hookeri mediante organogénesis directa de semillas germinadas in vitro en medio base MS suplementado con BAP (2.5 y 5 mg L-1) y BAP+ANA (2.5, 5.0 + 0.1,0.5 mg L-1 respectivamente), con un testigo para cada establecimiento. Para los subcultivos se utilizó medio MS y brotes completos como propágulo. El ácido sulfúrico 4N permitió establecer las semillas in vitro almacenadas sin tratamiento previo. Se empleó un diseño experimental completamente al azar, en todos los experimentos. Los primeros subcultivos se realizaron con las mismas concentraciones del establecimiento, pero la hiperhidratación (HH) afectó su calidad. Los brotes generados en dos subcultivos consecutivos con 0.5 mg L-1 de BAP, fueron subcultivados en concentraciones más bajas de BAP a 0, 0.5, 1, 1.5 y 2.5 mg L-1 durante 30 días. Estos produjeron brotes sanos (BS) y brotes con HH inicial (BHHI). En estos el mayor número de brotes se generó en la concentración 1.5 mg L-1 (SC3, 6.7 brotes) y en 0.5 mg L-1 en promedio de todos (SC4, SC5 y SC5-1) los subcultivos se obtuvieron 9. Esta última concentración permitió la recuperación de BHHI y obtener 73 % de sobrevivencia y enraizamiento de propágulos madre. _______________ GENETIC RESCUE OF Calibanus hookeri (LEM.) TREL. ABSTRACT: Calibanus hookeri synonymy Beaucarnea hookeri, endemic of Mexico and withcategory of risk threatened (NOM-059-SEMANARNAT-2010), its morphology that the characterize is its caudex, of fissured crust grayish brown color, leaves arranged in rossette almost sessile distributed in the caudex giving a caespitose appearance. It is found in very localized places and in populations with few individuals. So than, in view of this situation, the in vitro propagation is an option to satisfy the demand in horticultural market, but also to desing reintroduction programs, contributing to its conservation. Protocols exist to propagate the genera Beaucarnea, Dasylirion, Nolina and C. hookeri by direct organogenesis on MS medium supplemented with various cytokinins at high concentrations, but the subculture of this species they have not studied it. The objetive of this work was to generate an in vitro subculture protocol for C. hookeri by direct organogenesis of in vitro germinated seed in MS basal medium supplemented with BAP ((2.5, 5 mg L-1) and BAP+ANA (2.5, 5 + 0.1, 0.5 mg L-1), and a control treatment without regulator growth, for each establishment. For subcultures, MS medium and whole shoots were used as propagule. The 4N sulfuric acid allowed to stablish the seeds in vitro stored without previous treatment. A completely randomized experimental design was executed in all experiments. The first subcultures (SC) were carried out with the same concentration as in the establishment, but hyperhydration (HH) affected theirs quality. Subculture SC3 with BAP (0, 0.5, 1, 1.5 and 2.5 mg L-1) produced healthy (HS) and hyperhydrated (HHS) shoots, and shoots subcultures (SC4, SC4-1, SC5, SC5-1) twice consecutively with 0.5 mg L-1 BAP for 30 days. In the subcultures, the highest number of shoots was generated at 1.5 (SC3, 6.7 shoots) and 0.5 (SC4, 9.7; SC4-1, 6.19 and SC 5-1, 10.36 shoots for propagule) mg L-1 BAP. This last concentration allowed the recovery of HHS and the highest percentage 73.3 of survival mother propagules rooted.