Hongos asociados al escarabajo ambrosial Xylosandrus curtulus (Eichhoff) (Coleoptera: Scolytidae) en Ziracuaretiro, Michoacán, México.
Abstract
La relación simbiótica entre escarabajos descortezadores y sus hongos asociados ha sido un tema de importancia mundial ampliamente estudiado en áreas forestales; sin embargo, recientemente ha despertado un interés muy especial el estudio de los escarabajos de los géneros Xyleborus, Xylosandrus y Euwallacea y sus hongos ambrosiales; estos escarabajos han desarrollado una estructura especializada similar a un saco (micangio) para la transmisión del simbionte fúngico y la dispersión en árboles hospedantes, también pueden introducir hongos fitopatógenos en ambientes naturales y áreas cultivadas. Tomando en cuenta esta información, los objetivos del presente trabajo fueron tipificar el micangio mesonotal de Xylosandrus curtulus, caracterizar molecularmente a la especie, aislar los hongos asociados a este escolítido y verificar la patogenicidad de las cepas mediante los Postulados de Koch, en plantas de aguacate Hass bajo condiciones de invernadero. El estudio se realizó en escarabajos ambrosiales colectados en 2019 en un huerto comercial de aguacate Hass, mediante trampeo con etanol y agua destilada como medio de colecta, en Ziracuaretiro, Michoacán. Los escarabajos se preservaron en agua destilada y bajo condiciones de -5 ºC para mantener hidratados los tejidos y áreas membranosas. Se colectaron 76 hembras y la especie se determinó con claves taxonómicas y mediante un análisis molecular que corroboró la identidad de Xylosandrus curtulus, además se generó un árbol filogenético que muestra su polifilía, e indica la cercanía con otros géneros de escarabajos ambrosiales de la tribu Xyleborini. El micangio de este escolítido consiste en un par de sacos oblongos, hialinos y membranosos, embebidos en la cavidad del mesotórax y funciona como una estructura de almacenaje de simbiontes fúngicos, los cuales han sido los más estudiados por su impacto en áreas forestales. También se contribuyó con cuatro secuencias de ADN de esta especie de escolítido, debido a que no existen registros de ésta en la base de datos del NCBI Genbank. En el aislamiento de patógenos, se sembraron 40 insectos disectados en cámara húmeda y medio Agar Spezieller Nährstoffarmer; se obtuvieron cepas de Geosmithia pallida, Purpureocillium lilacinum, Trichoderma asperellum, Curvularia lunata, Cladosporium anthropophilum y Stilbocrea gracilipes. Se reporta por primera vez a Geosmithia pallida como hongo simbionte de X. curtulus. De las cepas fúngicas, Curvularia lunata se registra por primera vez como patogénica en plantas de aguacate Hass. Las pruebas de patogenicidad deben establecerse mínimo durante cuatro meses para el re-aislamiento de las cepas fúngicas ambrosiales en hospederos silvestres y aguacate Hass debido a su lento crecimiento. El hallazgo de Citrobacter murliniae, es un antecedente para estudiar asociaciones de microbiota de escarabajos ambrosiales. _______________ FUNGI ASSOCIATED WITH AMBROSIAL BEETLE Xylosandrus curtulus (Eichhoff) (COLEOPTERA: SCOLYTIDAE) IN ZIRACUARETIRO, MICHOACÁN, MEXICO. ABSTRACT: The symbiotic relationship between bark beetles and their associated fungi has been a topic of worldwide importance, widely studied in forest areas; however, recently the study of beetles of the genera Xyleborus, Xylosandrus, and Euwallacea and their ambrosial fungi has aroused a very special interest. These beetles have developed a specialized structure similar to a sack (mycangium) for the transmission of fungal symbiont and posterior dispersion in host trees; they can also introduce phytopathogenic fungi into natural environments and cultivated areas. Taking this information into account, the objectives of this work were to typify the mesonotal mycangium of Xylosandrus curtulus and molecular characterization of the species. The study was carried out in ambrosial beetles collected in 2019 in a commercial Hass avocado orchard, by trapping with ethanol and distilled water as a collection medium, in Ziracuaretiro, Michoacán. The beetles were preserved in distilled water and under conditions of -5 ° C to keep the tissues and membrane areas hydrated. In total 76 females were collected and the species was determined with the taxonomic keys and through a molecular analysis, in this way the identity of Xylosandrus curtulus was corroborated; in addition a phylogenetic tree was generated that shows its polyphilia, and indicates the proximity with other genera of ambrosial beetles of the Xyleborini tribe. The mycangium of this scolitid consists of a pair of oblong, hyaline and membranous sacs, embedded in the cavity of the mesothorax and functions as a storage structure of fungal symbionts, which have been the most studied for their impact on forest areas. In addition, it was contributed with four DNA sequences of this scolitid species, because there are not records of it in the NCBI Genbank database. In the isolation of pathogens, 40 dissected insects were seeded in a humid chamber and medium Spezieller Nährstoffarmer Agar; strains of Geosmithia pallida, Purpureocillium lilacinum, Trichoderma asperellum, Curvularia lunata, Cladosporium anthropophilum, and Stilbocrea gracilipes were obtained. Geosmithia pallida is the first reported as a X. curtulus symbiote fungus. Of the fungal strains, Curvularia lunata is the first recorded as a pathogen in Hass avocado plants. Pathogenicity tests should be established for at least four months for the re-isolation of ambrosial fungal strains in wild hosts and Hass avocado due to their slow growth. The finding of Citrobacter murliniae is a background to study microbiota associations of ambrosial beetles.
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