Etiología de la mancha acuosa de la jamaica (Hibiscus sabdariffa L) en Tabasco, México

Abstract

El objetivo de este estudio fue identificar el agente causal de la “mancha acuosa” en jamaica (Hibiscus sabdariffa L.) y describir los síntomas externos de la enfermedad. Dos lotes de observación fueron conducidos de Julio a Noviembre de 2009, cada uno con 225 plantas de jamaica. Se colectaron muestras de hojas en 39 plantas por cada uno de los lotes establecidos. Para identificar el patógeno, los procesos de aislamientos se llevaron a cabo a partir de hojas enfermas en cajas de petri con papa-dextrosa-agar (PDA) como medio de cultivo. La patogenecidad se demostró mediante los postulados de Koch. La caracterización morfológica reveló la presencia de picnidios de forma globosa a subglobosa de 250 µm de largo x 233.1 µm de ancho, lisos, inicialmente hialinos tornándose café oscuro, en su interior contenían una masa oscura de conidios centrales. Los conidióforos eran densos, delgados, simples o ramificados, los conidios inmaduros son hialinos llegando a ser marrón claro, inequilaterales, lisos, elipsoidales, rectos a ligeramente curvados, de 10-16.2 μm x 5-7 µm y que corresponde al género Phoma sp (Barnett y Hunter, 1998). Por otra parte, la identificación molecular de las cepas aisladas se basó en la amplificación del gen en las regiones ITS DNAr. Las cepas fueron cultivadas en medio líquido YEPD. Se extrajo el ADN cromosómico y se amplificó el gen en las regiones ITS DNAr por PCR empleando los indicadores ITS1-ITS4. Las secuencias del ADN obtenidos fueron analizados por el software Chroma Versión 2.31 (Technelysium Pty Ltd) y alineado con secuencias depositadas en la base de datos de la NCBI (National Center for Biotechnology Information). La amplificación y secuenciación del gen permitió la identificación del hongo aislado como: Pilidiella diplodiella (sinónimo: Phoma diplodiella). En México este patógeno sólo se ha asociado al cultivo de: Vitis vinífera y Citrus aurantifolia por lo que este es el primer reporte de P. diplodiella causando “mancha acuosa” en el cultivo de jamaica. _______________ ETIOLOGY OF THE WATERY SPOT OF ROSELLE (Hibiscus sabdariffa L.) IN TABASCO, MÉXICO. ABSTRACT: The aim of this study was to identify the causal agent of "water spot" in roselle (Hibiscus sabdariffa L.) and describe the external symptoms of the disease. Two lots of observation were conducted from July to November 2009, each one with 225 plants of roselle. Leaf samples of 39 plants were collected from each of the established lots. To identify the pathogen, isolation processes were carried out with diseased leaves in Petri dishes using potato-dextrose-agar (PDA) as means of cultivation. The pathogenicity was proved by Koch's postulates. The morphological characterization revealed the presence of pycnidia globose to subglobose of 250 microns long for 233.1microns broad of, smooth, initially hyaline, becoming dark brown, its interior contained a central dark mass of conidia. The conidiophores were dense, slim, and simple or branched. Immature conidias are hyaline and they can be light brown, inequilaterals, smooth, and ellipsoid, straight to slightly curved, 10-16.2 x 5-7 microns long, these characteristics correspond to the genus Phoma sp (Barnett and Hunter, 1998). Furthermore, the molecular identification of isolated strains was based on gene amplification in DNAr ITS regions. The strains were grown in YEPD liquid medium. Chromosomal DNA was extracted and the gene in the DNAr ITS regions was amplified by PCR using ITS1-ITS4 indicators. DNA sequences were analyzed by the Chroma software version 2.31 (Technelysium Pty Ltd) and aligned with sequences deposited in the database of the NCBI (National Center for Biotechnology Information). The amplification and gene sequencing allowed the identification of the isolated fungus as Pilidiella diplodiella (syn. Phoma diplodiella). In Mexico, this pathogen has only been associated with the cultivation of: Vitis viniferous, Citrus aurantifolia. Therefore this is the first report on P. diplodiella causing "water spot" in the cultivation of roselle.