Caracterización y evaluación de nematodos entomopatógenos sobre ninfas de mosca pinta, Aeneolamia spp y Prosapia spp (Hemiptera: cercopidae) en el cultivo de caña de azúcar.

Abstract

En el estado de Veracruz, México, se realizó la búsqueda de nematodos entomopatógenos (NEP) en suelos de ingenios cañeros. A través de trampeo con larvas de la polilla de la cera Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyrallidae) como “insectos cebo”, se obtuvieron dos cepas de nematodos pertenecientes a las familias Heterorhabditidae y Steinernematidae. Las cepas fueron identificadas mediante caracteres morfológicos, morfométricos y por medio de herramientas moleculares. La cepa CP13JA fue identificada como Heterorhabditis indica y fue aislada en parcelas del ingenio La Gloria. La cepa CP13ES fue identificada como una posible nueva especie del género Steinernema sp. aislada en parcelas del ingenio Constancia. Se consideró a Steinernema sp. taxonómicamente muy cercana a S. riobrave y filogenéticamente relacionada con especies del grupo IV (bicornutum-certophorum-riobrave). Este grupo IV se caracteriza por presentar juveniles infectivos con papilas laterales proyectadas en forma de “cuernos”. Los juveniles infectivos (JI) de Steinernema sp. CP13ES se diferencian de otras especies de este grupo por presentar los JI más pequeños que oscila entre 409 a 566µm (498µm ± 6.5). Además como característica particular presenta anastomosis en la cutícula en la región ventral, la cual está ubicada posteriormente al poro excretor hasta antes del inicio del ano. Las hembras de 1ª y 2ª generación de Steinernema sp. presentan la vulva ubicada al 60% del cuerpo. Las hembras de 1ª generación presentan además un mucrón al final de la cola, mientras que las hembras de 2ª generación poseen un hinchamiento en el labio anal posterior. La terminación de la cola de los machos de 1ª generación es redonda, mientras que los machos de 2ª generación presentan una espina caudal. Como característica biológica importante, se observó que los juveniles infectivos de Steinernema sp. emergen en el 5º al 6º día post-infección, cuando las larvas infectadas de G. mellonella son expuestas a 30-35ºC. La emergencia de los juveniles infectivos ocurre en el 11vo post-infección cuando los insectos son infectados a 22-25ºC. En este estudio se evaluó la virulencia de estas cepas en ninfas de mosca pinta (Aeneolamia spp. y Prosapia spp.) en campo, en lotes de caña de azúcar localizados cerca de los ingenios Constancia y Potrero de Veracruz, México. En el primer ensayo se aplicaron las dos cepas de NEP + dispersante (BREAK-THRU®) en 30 mL ha-1, así como el testigo (agua) + dispersante. En el segundo ensayo se evaluó la cepa Steinernema sp. + dispersante y el testigo + dispersante. La dosis utilizada en ambos experimentos fue de 66,000 JI m-2 en 19 L de agua. En el primer ensayo, la mortalidad observada en H. indica fue 73% y 62% en Steinernema sp. En el segundo ensayo, la población de salivazo se redujo significativamente (P= 0.0001) posterior a la aplicación de Steinernema sp. + dispersante; comparado con el testigo, cuya tendencia fue aumentar las poblaciones en el tiempo. _______________ CHARACTERIZATION AND EVALUATION OF ENTOMOPATHOGENIC NEMATODES ON NYMPHS OF Aeneolamia spp. AND Prosapia spp. (HEMIPTERA: CERCOPIDAE) IN SUGAR CANE FIELDS. ABSTRACT: In the state of Veracruz, Mexico, the search for entomopathogenic nematodes (EPN) was conducted in soils of sugarcane fields. Through insect baiting with larvae G. mellonella L. (Lepidoptera: Pyrallidae) as “bait insects”, two strains of nematodes were obtained to the families Heterorhabditidae and Steinernematidae. The two strains were identified by morphological, morphometric and molecular tools. The strain CP13JA was identified as Heterorhabditis indica isolated in plots of the La Gloria mills. Whereas strain CP13ES was identified as a possible new species of the genus Steinernema sp. isolated on plots of Constancia mills. This species is related taxonomically close to S. riobrave and phylogenetically related to species of the group IV (bicornutum-certophorum-riobrave). This group IV is characterized by presenting infective juveniles with lateral papillae projected in the form of “horns-like”. The infective juveniles (IJ) of Steinernema sp. CP13ES characterized by the infective juveniles ranging from 409 to 566µm (498µm ± 6.5), which are shorter than the IJ of other species in this clade. In addition, the IJ present anastomosis in the cuticle in the ventral region, which extends from the excretory pore to the beginning of the anus. The females of 1st and 2nd generation of Steinernema sp. present the vulva located at 60% of the body. 1st generation females have a mucronated tail, whereas 2nd generation females present a postanal swelling. 1st generation males are characterized by a round and non-mucronated tail. 2nd generation male have tail with a caudal spine. As important biological characteristic, was observed that the infective juveniles of Steinernema sp. emerge in 5th to 6th days post-infection, when infected G. mellonella larvae are exposed at 30-35o C. The emergence of infective juveniles occurs in the 11th post-infection when the insects are infected at 22-25o C. We conducted field trails to assess the virulence of these strains in fields of nymphs of spittlebugs (Aeneolamia spp. and Prosapia spp.) in sugarcane fields located near the Constancia and Potrero mills in Veracruz, Mexico. In the first assay the two strains of EPN + dispersant (BREAK-THRU®) were applied in 30 mL ha-1. The control consisted of water + dispersant alone. In the second trail, we only tested the effect of Steinernema sp. strain CP13ES + dispersant. The control consisted of water + dispersant only. Nematode suspension considered a dose of 66,000 JI m-2 in 19 L in water in both experiments. In trial one, H. indica showed the highest nymph mortality 73% followed by 62% Steinernema sp. In the second trial, the combined application of CP13ES + dispersant caused a reduction in the spittlebugs population (P = 0.0001); compared to the control, whose tendency was to increase populations over time.