Selenio orgánico y expresión folicular del LDLr y SR-B1 in vitro.

Abstract

El selenio es mineral esencial para los animales, influye en la actividad reproductiva provocando mejoras en los gametos, así como, aumento en la síntesis de hormonas esteroideas, para lo cual, el colesterol es molécula base. Existe información suficiente sobre la importancia del colesterol en la síntesis hormonal; sin embargo, es poca o nula la información existente sobre el efecto que la selenometionina puede desencadenar sobre la expresión de receptores para colesterol en células foliculares. Por lo que esta investigación partió de la hipótesis que, la exposición de folículos a selenometionina en dosis y tiempos diferentes determina la expresión de LDLr y SR-B1; receptores para lipoproteínas de baja (LDL) y alta densidad (HDL), respectivamente. El objetivo planteado fue: identificar sí la exposición in vitro de folículos ováricos a selenometionina en dosis y tiempos diferentes afecta la expresión de LDLr y SR-B1, receptores que transportan colesterol a células esteroidogénicas. Se obtuvieron ovarios de ovejas, para extraer folículos entre 2 y 3 mm de diámetro, los cuales, fueron cultivados en medio enriquecido con selenometionina, a dosis de 0, 5, 10, 20 ng mL-1 y tiempos de 24, 72 y 96 h. Después de suspender el cultivo, los folículos se fijaron con formol al 36% y embebieron en parafina, se realizaron cortes histológicos e inmunohistoquímica para determinar la expresión de receptores LDLr y SR-B1. Se usó un diseño completamente al azar con arreglo factorial 4 x 3 con submuestreo. Para analizar los datos se empleó el procedimiento PROC MIXED y la prueba de Tukey (p < 0.05) para la comparación de medias. Los resultados no mostraron diferencias debido al tratamiento y tiempo (p > 0.05) para ninguno de los receptores, solo para SR-B1 en la interacción tratamiento tiempo mostró diferencia (p < 0.05). La exposición de folículos ováricos a selenio orgánico en diferentes dosis y tiempo no influyó en la expresión y localización de receptores para lipoproteínas de baja densidad (LDLr); por otra parte a 5 ng mL-1 por 72 h influyó en la cantidad de intensidad luminosa emitida por la expresión de receptores para lipoproteínas de alta densidad (SR-B1). La localización de receptores se observó en teca y granulosa de forma uniforme y punteada en membrana celular, citoplasma, y área perinuclear de células foliculares. El selenio no fue determinante en la expresión y localización de los receptores a nivel de folículos los cuales pueden ser expuesto a dosis de 20 ng mL-1 de selenio hasta 96 h sin afectar su integridad, y mantiene actividad esteroidogénica. _______________ SELENIUM ORGANIC AND EXPRESSION FOLLICULAR OF LDLR AND SR-BI IN VITRO. ABSTRACT: Selenium is essential for animals mineral, it influences in the reproductive activity leading improvements in the gametes, as well as, increase in the synthesis of hormones steroid, for which, the cholesterol is molecule it basis. There is sufficient information on the importance of cholesterol in the hormonal synthesis; however, is little or null information existent on the effect that the selenomethionine can unchain on the expression of receptors for cholesterol in follicular cells. So this research came from the hypothesis that, the exposure of follicles to selenomethionine in doses and different times determines the expression of LDLr and SR-B1; lower lipoprotein receprtors (LDL) and high density (HDL), respectively. The stated objective was: to identify if in vitro exposure of ovarian follicles to doses selenomethionine and different times affects the expression of LDLr and SR-B1, receptors carrying cholesterol ins steroidogenic cells. Ovaries in sheep, were obtained to extract follicles between 2 and 3 mm in diameter, which, were cultivated between supplemented with selenomethionine, at doses of 0, 5, 10, 20 ng mL-1 and times of 24, 72 and 96 h. after suspending the cultivation, the follicles were fixed with paraformaldehyde to 36% and that stepped on paraffin, histological and inmunoshistochemical were carried out courts to determine the expression of LDLr and SR-B1 receptors. Complettely at random in arrangement with design was factorial 4 x 3 with subsampling. The PROC MIXED procedure and Tukey test was used to analyze the data (p <0.05) for the comparison of means. The results showed no difference due to treatment and time (p> 0.05) for any of the receptors, only to SR-B1 in the interaction treatment time showed differences (p <0.05). The exposure of ovarian follicles to organic selenium in different dose and time didn't influence in the expression and localization of receptors (LDLr); low density lipoprotein; In addition to 5 ng mL-1 for 72 h influenced the amount of luminous intensity emitted by the expression of receptors for (SR-B1) high density lipoprotein. Localization of receptors was observed in techa and granulosa of uniform dotted form in cell membrane, cytoplasm, and perinuclear area of follicular cells. Selenium was not decisive in the expression and localization of receptors at level of follicles which can be exposed to doses of 20 ng mL-1 of selenium up to 96 h without affecting their integrity, and it maintains steroidogenic activity.