Métodos moleculares y genéticos para el estudio de Tomato spotted wilt virus (TSWV) en plantas.

Abstract

El TSWV se encuentra entre los virus más importantes que infectan plantas, debido a sus características genéticas, biológicas y su amplia distribución. El TSWV tiene la capacidad de infectar a un amplio número de especies de plantas de importancia económica. Tiene la habilidad de formar distintos aislamientos por la recombinación de sus tres fragmentos de ARN y por su alta frecuencia de error de su replicasa. Asimismo, tiene la capacidad de romper la resistencia en diversas especies de plantas. Dichas características se deben a que el genoma del TSWV está compuesto por tres cadenas de ARN, los cuales son nombrados como segmento grande (L), mediano (M) y pequeño (S). El segmento S codifica a la proteína NSs, que está involucrada en suprimir el mecanismo de silenciamiento de ARN con la finalidad de realizar una eficaz infección en el hospedante. Sin embargo, no se conoce como interfiere la proteína NSs en la actividad de los componentes que conforman el mecanismo de silenciamiento de ARN de la planta. Por lo cual, el objetivo de la presente investigación fue clonar el fragmento NSs con la ayuda de técnicas moleculares y genéticas. Con base en los análisis moleculares y genéticos, los cuales sirvieron para identificar y monitorear el fragmento NSs, se demostró el comportamiento de los clones del fragmento NSs al suprimir el mecanismo de silenciamiento de ARN de la planta. La generación y utilización de los clones del fragmento NSs, ayudara a comprender y a generar bases para determinar su mecanismo en el proceso de silenciamiento génico de la planta cuando es infectada por el TSWV. _______________ MOLECULAR AND GENETIC METHODS FOR THE STUDY OF Tomato spotted wilt virus (TSWV) IN PLANTS. ABSTRACT: TSWV has the ability to infect a wide range of plant species of economic importance. TSWV is among the most important viruses that infect plants, due to its genetic, biological characteristics and wide distribution. TSWV it has the capacity to form different isolates by the recombination of its three fragments of RNA and by the high frequency of replicase error. Furthermore, it has the ability to break resistance in several plant species. These characteristics are due to the fact TSWV genome is composed of three RNA strands, which are named as large (L), medium (M) and small (S) segments. The S segment encoded to the NSs protein, which is involved in suppressing the RNA silencing, with the purpose of an effective infection in the host. However, the role of NSs silencing suppression in virus infection and movement has not been determined. For this reason, the objective of the present investigation was to clone the NSs fragment using molecular and genetic techniques. Based on molecular and genetic analyzes was demonstrated the behavior of clones of the NSs fragment by suppressing the mechanism of RNA silencing of the host. The generation and utilization of clones of the NSs fragment will help us to understand and generate bases for determining the gene silencing process of the plant during TSWV infection.