Saneamiento vegetativo de limón persa (Citrus x latifolia) con HLB y CTB mediante meristemos apicales y termoterapia in vitro.

Abstract

El limón Persa (Citrus × latifolia) presenta características sobresalientes entre las limas ácidas, carece de semillas y se cosecha fácil debido a la poca cantidad de espinas. Este cítrico es el segundo en importancia para México. Sin embargo, la producción se ve limitada por la presencia de enfermedades ocasionadas por hongos, bacterias y virus. Enfermedades como el Huanglongbing (HLB) y el Virus de la Tristeza de los Cítricos (CTV) son descritas en la actualidad como las enfermedades más devastadoras en los cítricos, produciendo fruta de mala calidad, bajos rendimientos en campo y en muchos casos provocan la muerte de los árboles. Los informes sobre la eliminación del HLB y el CTV en limón Persa por métodos de laboratorio son escasos, por ello se propusieron dos métodos in vitro (regeneración de meristemos apicales y termoterapia) para el saneamiento vegetativo. Se recolectaron hojas de árboles con síntomas de las enfermedades, se determinó la presencia de HLB y CTV mediante pruebas moleculares, se tomaron segmentos nodales positivos y se regeneraron en medio de cultivo Murashige y Skoog (MS). La regeneración de meristemos se llevó a cabo en medio MS suplementado con diferentes concentraciones de 6-bencilaminopurina y ácido indolacético, luego se incubaron a oscuridad total y se evaluó el crecimiento de brotes y hojas a 15, 30 y 40 días, en la termoterapia se tomaron ápices de 2.5 cm a los cuales se aplicó temperaturas de 33 hasta 45 °C en tiempos de 3, 4, 5 y 6 h. Los resultados demostraron que los meristemos regenerados y los explantes sometidos a la termoterapia dieron negativo a HLB y CTV. En el saneamiento de HLB, se obtuvo en los meristemos una media de 1.5 hojas producidas y 1.19 brotes regenerados en medio MS suplementado con 1 mg L-1 BAP y 0.5 mg L-1 AIA y en la termoterapia se demostró que la mejor temperatura fue de 40 °C donde se pudo generar mayor sobrevivencia, mayor número de brotes y mayor porcentaje de vitroplantas saneadas. En CTV los meristemos apicales regenerados a oscuridad por 15 días obtuvieron mayor número de brotes y hojas. En la termoterapia el tratamiento con mayor éxito fue donde se empleó 37 °C durante 4 h, promoviendo la regeneración de 4.8 brotes y 5.9 hojas por explante. _______________ VEGETATIVE SANITATION OF PERSIAN LEMON (CITRUS × LATIFOLIA) WITH HLB AND CTV THROUGH MERITEMOS APICALES AND TERMOTERAPIA IN VITRO. ABSTRACT: Persian lemon (Citrus × latifolia) presents outstanding characteristics among acidic limes, lacks seeds and is easily harvested due to the small amount of thorns. This citrus is the second in importance for Mexico. However, production is limited by the presence of diseases caused by fungi, bacteria and viruses. Diseases such as Huanglongbing (HLB) and the Citrus Tristeza Virus (CTV) are currently described as the most devastating diseases in citrus fruits, producing fruit of poor quality, low yields in the field and in many cases cause death of the trees. Reports on the elimination of HLB and CTV in Persian lemon by laboratory methods are scarce, so two in vitro methods (regeneration of apical meristems and thermotherapy) for vegetative sanitation were proposed. Tree leaves with disease symptoms were collected, the presence of HLB and CTV were determined by molecular tests, positive nodal segments were taken and regenerated in Murashige and Skoog culture medium (MS). The regeneration of meristems was carried out in MS medium supplemented with different concentrations of 6-benzylaminopurine and indoleacetic acid, then incubated in total darkness and the growth of shoots and leaves was evaluated at 15, 30 and 40 days, in the thermotherapy they took apexes of 2.5 cm to which temperatures of 33 to 45 ° C were applied at times of 3, 4, 5 and 6 h. The results showed that regenerated meristems and explants subjected to thermotherapy were negative for HLB and CTV. In the sanitation of HLB, an average of 1.5 leaves produced and 1.19 regenerated shoots in MS medium supplemented with 1 mg L-1 BAP and 0.5 mg L-1 AIA were obtained in the meristems and in thermotherapy it was shown that the best temperature was of 40 ° C where it was possible to generate greater survival, greater number of outbreaks and higher percentage of healthy vitroplants. In CTV the apical meristems regenerated in darkness for 15 days obtained a greater number of buds and leaves. In thermotherapy, the most successful treatment was where 37 ° C was used for 4 h, promoting the regeneration of 4.8 shoots and 5.9 leaves per explant.