Crecimiento de cuatro cepas del género Rhizobium en presencia de hidrocarburos policíclicos aromáticos (HPA)

Abstract

Este estudio evaluó el crecimiento de cuatro cepas de Rhizobium en medio contaminado con fenantreno (PHE) o benzo[a]pireno (BaP) en concentraciones de 0, 10, 20, 40, 60, 80 y 100 µg mL-1. En la primera fase experimental, R. tropici CIAT899, R. tropici PRF81, R. leucaena CFN299 y R. etli CFN42 crecieron en condiciones in vitro o en simbiosis con Phaseolus vulgaris L. en presencia de PHE y BaP. El crecimiento in vitro de las cuatro cepas a las 24 h, disminuyó al aumentar las concentraciones de ambos HPA; sin embargo, el BaP fue más tóxico para su crecimiento. Las cuatro cepas ante 80 y 100 µg BaP mL-1 presentaron una fase de adaptación; para CIAT899 y PRF81 esta fase fue de 48 h, y para CFN299 y CFN42 esta fase fue de 72 y 96 h, respectivamente. La simbiosis de las cuatro cepas con Phaseolus se evaluó a los 21 días; el PHE y el BaP disminuyeron el número de nódulos, y la biomasa aérea y radical. Las cepas CIAT899 y PRF81 fueron más tolerantes a los dos HPA al formar mayor número de nódulos en comparación con las cepas CFN299 y CFN42. En la segunda fase experimental se evaluó el crecimiento de Rhizobium tropici CIAT899 cuantificando las unidades formadoras de colonias, en PHE y BaP. El crecimiento y la biomasa bacteriana en presencia de PHE fueron menores que los obtenidos ante BaP. Mediante análisis de cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS), R. tropici CIAT899 degradó 50% de PHE y 45% de BaP, a las 120 h. _______________ GROWTH OF FOUR Rhizobium STRAINS IN PRESENCE OF POLYCYCLIC AROMATIC HYDROCARBONS (PAH). ABSTRACT: This study evaluated the growth of four Rhizobium strains in contaminated medium with phenanthrene (PHE) or benzo[a]pyrene (BaP) at concentrations of 0, 10, 20, 40, 60, 80 and 100 µg mL-1. In the first experimental stage, R. tropici CIAT899, R. tropici PRF81, R. leucaena CFN299 and R. etli CFN42 were free-living grown or in symbiosis with Phaseolus vulgaris L. at PHE or BaP contamination. At 24 h, growth of the four bacterial strains decreased as concentrations of both PAH increased, although BaP had more toxic effects. Four strains exposed to 80 and 100 µg BaP mL-1 showed an adaptation phase; for CIAT899 and PRF81 this phase was of 48 h, whereas for CFN299 and CFN42 was of 72 and 96 h, respectively. The symbiosis of the four bacterial strains with Phaseolus was evaluated at 21 days. Number of nodules, and shoot and root biomass diminished at PHE or BaP contamination. Strains CIAT899 and PRF81 had more tolerance to both PAH by showing high number of nodules when compared to CFN299 and CFN42. For the second experimental stage, the growth of R. tropici CIAT899 was evaluated by counting the colony forming units when exposed to PHE and BaP. The bacterial growth and biomass in presence of PHE were lower than that obtained for BaP. By analyzing with gas chromatography coupled/mass spectrometry (GC-MS), it was demonstrated that R. tropici CIAT899 degraded 50% of PHE, and 45% of BaP, at 120 h.