Actividad de pal, acumulación de fenoles y flavonoides en el chile CM-334 infectado por Nacobbus aberrans e inoculado en el follaje con Phytophthora capsici

Abstract

Se evaluó la respuesta del chile (Capsicum annuum) CM-334 infectado con Nacobbus aberrans (Na) y en el follaje inoculado con diferentes tipos de inoculación de Phytophthora capsici. En plantas completas o con el tallo decapitado se inoculo micelio, en el follaje zoosporas asperjadas, por inmersión en una suspensión de zoosporas y también en la raíz. Se tuvieron experimentos con plantas susceptibles (var. Joe E. Parker) y resistentes (CM-334), infectadas o sin infectar con N. aberrans y 21 días posteriores a la inoculación (pi) con el nematodo se inocularon con P. capsici; bajo un diseño completamente al azar en cámaras bioclimáticas. De los 5 a los 30 días pi con el oomiceto (pio) se registró la longitud de necrosis (cm), la colonización de hoja, tallo o raíz por el oomiceto y la severidad de la enfermedad. La actividad de PAL, acumulación de fenoles y flavonoides totales fue medida por espectofotometría y la acumulación de transcritos fue determinada por Northern blot. Los datos se sometieron a análisis de varianza (P0.05) y prueba de Tukey. Con todos los tipos de inoculación las plantas susceptibles presentaron necrosis en el tallo o tizón en las hojas y murieron. La presencia de Na en raíces de las plantas resistentes CM-334 decapitadas inoculadas con micelio permitió que P. capsici lograra establecerse, pero en las plantas no decapitadas la presencia del nematodo aparentemente no abatió la resistencia del CM-334; en las raíces de las plantas resistentes inoculadas con ambos patógenos hubo muerte de plantas (11.1%) a los 45 días pio. En plantas inoculadas con micelio y Na, la necrosis y severidad fueron mayores que en las plantas resistentes inoculadas solo con micelio; pero en plantas infectadas por el nematodo e inoculadas por aspersión de zoosporas al follaje no se observaron síntomas. En contraste, con la inmersión en zoosporas, la lesión en las hojas fue macróscopica y como una respuesta de hipersensibilidad que se expresó en las plantas con o sin el nematodo. En plantas decapitadas inoculadas con micelio, la actividad de PAL incrementó en 39.1%, 29.6% y 55.7% en hojas, tallos y raíces a las 12 hpio y 24 hpio, respectivamente. Con la aspersión de zoosporas el incremento se observó a las 12 y 24 hpio, en hojas tallos y raíces (17.7%, 77.9% y 30.2%, respectivamente) en comparación con las plantas infectadas con ambos patógenos. Similarmente, el contenido de fenoles solubles totales incrementó a las 12 hpio en los tres estratos de las plantas inoculadas con micelio y con zoosporas la acumulación se observó a las 6 y 12 hpi. El contenido de flavonoides incrementó en raíces y tallos de plantas inoculadas con micelio y Na, mientras que en las plantas inoculadas con zoosporas y el nematodo el incremento ocurrió sólo en las raíces. Con la inmersión en zoosporas la actividad de PAL incrementó en un 26.2% y en un 52.3% a las 6 y 12 hpio en hojas y raíces, respectivamente, con relación a las plantas inoculadas con ambos patógenos; de manera similar a las 12 hpio la acumulación de transcritos en las hojas fue mayor 1.5 veces y en las raíces en un 1.9 veces en comparación con las plantas inoculadas con ambos patógenos. Con excepción de las plantas inoculadas por aspersión con zoosporas, en todas las demás P. capsici se reaisló de plantas infectadas por el nematodo e inoculadas con el oomiceto, probablemente por una disminución en la expresión en los mecanismos de defensa en las plantas infectadas por N. aberrans. La presencia de N. aberrans en las raíces redujo la actividad de PAL y la acumulación de transcritos en el follaje inoculado con P. capsici, sin embargo, la reacción de hipersensibilidad en el follaje no fue inhibida por la presencia del nematodo. _______________ PAL ACTIVITY, PHENOLS AND FLAVONOIDS ACUMMULATION IN THE PEPPER CM-334 INFECTED BY NACOBBUS ABERRANS AND THE FOLIAGE INOCULATED WITH PHYTOPHTHORA CAPSICI. ABSTRACT: The response of pepper (Capsicum annuum) CM-334 infected with Nacobbus aberrans (Na) and in foliage was inoculated with different kinds of inoculums of Phytophthora capsici. In whole plants or the decapitated stem was inoculated with mycelium, the leaves inoculated with zoospores sprayed and inmmersion on suspension of zoospores, and zoospores at the root were evaluated. The experiments had susceptible plants (var. Joe E. Parker) and resistant (CM-334), infected or not infected with N. aberrans and 21 days post inoculation (pi) with the nematode, these were inoculated with P. capsici, under a completely randomized design in a bioclimatic chambers. From 5 to 30 days pi with the oomycete (pio) was recorded the length of necrosis (cm), the colonization of the leaf, stem or root by the oomycete and severity of the disease. PAL activity, accumulation of phenolics and total flavonoids were measured by spectrophotometry and the accumulation of transcripts by Northern blot analysis, data were subjected to analysis of variance (P0.05) and Tukey test. With all types of inoculation of susceptible plants showed necrosis on the stem or leaf blight and died. The presence of Na in roots of resistant plants decapitated CM-334 inoculated with mycelium allowed P. capsici failed to establish, but not decapitated plants the presence of nematode resistance apparently struck the CM-334, in the roots of resistant plants were inoculated with both pathogens death of plants (11.1%) at 45 days principle. In plants inoculated with mycelium and Na, necrosis and severity were higher than in resistant plants inoculated with mycelium alone, but in nematode-infected plants and zoospores inoculated by spraying the foliage symptoms were not observed. In contrast, with immersion in zoospores, damage to the leaves was a hypersensitive response was expressed in plants with or without the nematode. In decapitated plants inoculated with mycelium, PAL activity increased by 39.1%, 29.6% and 55.7% in leaves, stems at 12 hpio and roots at 24 hpio, respectively. With the increasing zoospore spray was observed at 12 and 24 hpio, leaf stems and roots (17.7%, 77.9% and 30.2% respectively) compared with plants infected with both pathogens. Similarly, the total soluble phenolic content decreased at 12 hpio in the three layers of plants inoculated with mycelium and Na, Na and zoospores but the decrease was observed at 6 and 12 hpi. The flavonoid content increased in roots and stems of plants inoculated with mycelium and Na, whereas in plants inoculated with zoospores with the nematode the increase occurred only in the roots. Zoospores with immersion in PAL activity increased by 26.2% and 52.3% at 6 and 12 hpio in leaves and roots, respectively, relative to plants inoculated with both pathogens similar to the 12 hpio the transcript accumulation in the leaves was increased 1.5 times and in the roots by 1.9-fold compared with plants inoculated with both pathogens. The presence of N. aberrans in the roots reduced the activity of PAL and the accumulation of transcripts in the leaves inoculated with P. capsici, however, the hypersensitivity reaction in the foliage was not inhibited by the presence of the nematode. With the exception of plants inoculated by spraying with zoospores, in all other P. capsici was reisolated from infected plants by the nematode and inoculated with the oomycete, probably by a decrease in expression of defense mechanisms in plants infected by N. aberrans. The presence of N. aberrans in the roots reduced the activity of PAL and the accumulation of transcripts in the leaves inoculated with P. capsici, however, the hypersensitivity reaction in the foliage was not inhibited by the presence of the nematode.