Identificación de alelos polimórficos en el gen leptina de ovinos Katahdin

Abstract

El gen leptina se encuentra en el cuarto cromosoma del genoma ovino y bovino. Su receptor presenta seis isoformas a partir de un mismo ARNm. Se han identificado receptores para la hormona leptina en el hipotálamo y otros tejidos periféricos. La hormona leptina, participa en procesos fisiológicos relacionados con la regulación del metabolismo energético, consumo de alimento, deposición de grasa, reproducción e inmunidad, entre otros. En especies zootécnicas como bovinos y cerdos, se identifican polimorfismos del gen leptina asociados con la ingesta de alimentos, características de crecimiento y de la canal, y la calidad de la carne, los cuales son de interés para los productores pecuarios. El objetivo de esta investigación fue identificar polimorfismos del gen leptina en el exón 3 de ovinos Katahdin. El estudio consistió en un muestreo de 234 animales con una edad entre 3 y 18 meses, a los cuales se les extrajeron 5 mL de sangre de la vena yugular. La extracción de ADN a partir de sangre se realizó usando el kit Wizard® Genomic ADN Purification (PROMEGA). Para la amplificación del fragmento del gen leptina (Gen Bank: AJ512639) se utilizaron los primers con las siguientes secuencias Forward: 5′-AGGAAGCACCTCTACGCTC-3′, Reverse: 5′-CTTCAAGGCTTCAGCACC-3. El tamaño del producto amplificado fue de 471 pb. La variación alélica del gen leptina se obtuvo por PCR-SSCP y el análisis de secuenciación confirmo polimorfismos del nucleótido simple (SNPs) en el exón 3 del gen leptina. Las secuencias identificadas comparten alta similitud con las secuencias de leptina publicados en otras razas de ovinos. Los resultados confirman la presencia de tres polimorfismos (alelos 01, G y T), que corrobora la variación de tres alelos del exón 3 del gen leptina de ovinos Katahdin. Sin embargo es necesario identificar la presencia de SNPs y validar la asociación con los genotipos en ovinos Katahdin, antes de la implementación de programas en mejoramiento animal. _______________ ABSTRACT: The leptin gene is located on the fourth chromosome in the ovine and bovine genome. There are six different isoforms of the leptin receptor expression of same mRNA. Leptin receptors have been identified for the hormone leptin in the hypothalamus and other peripheral tissues. Leptin is a hormone involved in physiological processes related to the regulation of energy metabolism, feed intake, fat deposition, reproduction and immunity, among others things. In farm animals species such as cattle and swine, leptin gene polymorphisms was associated with feed intake, growth and carcass composition, and meat quality, which are of interest to livestock producers. The aim of this research was to identify polymorphisms of the leptin gene in exon 3 of Katahdin sheep. The study consisted of a sample of 234 animals with aged between 3 and 18 months, which were extracted 5 mL of blood from the jugular vein. DNA extracted from blood was performed using the Wizard®Genomic DNA Purification kit (Promega). For amplification of the leptin gene (GenBank: AJ512639) primers were used with the following sequences Forward: 5'-AGGAAGCACCTCTACGCTC-3 'Reverse: 5'-CTTCAAGGCTTCAGCACC-3. The size of the amplified product was 471 bp Allelic variation leptin gene was obtained by PCR-SSCP and sequence analysis of single nucleotide polymorphisms confirmed (SNPs) in exon 3 of the leptin gene. The identified sequences share high similarity with published sequences of leptin in other sheep breeds. The results confirm the presence of three polymorphisms (alleles 01, G and T), which bear out of three alleles in exon 3 of the leptin gene in Katahdin sheep. However it is necessary to identify the presence of SNPs and validate the association with genotypes in sheep Katahdin, before implementing livestock breeding programs.