Efecto del antraceno sobre el crecimiento in vitro del moho verde (Trichoderma spp) y su potencial para desarrollar estrategias de biorremediación in situ

Abstract

En el presente estudio se evaluó el efecto del antraceno y del ácido acetil salicílico (AAS) en el crecimiento in vitro de tres cepas de diferentes especies de Trichoderma (T. harzianum, T. aggressivum f. aggressivum, T. atroviride), aisladas de cultivos de substratos de diversos hongos comestibles. Se utilizaron tres concentraciones de antraceno (0.4 g, 0.8 g y 1.6 g) adicionando en cada caso AAS (100 µM) al medio de cultivo de agar papa y dextrosa (PDA). A la par se elaboró un control que consistió en medio de cultivo PDA, y el testigo de PDA más AAS (100 µM). Se determinó la velocidad de crecimiento, el área de la colonia, la producción de esporas y la actividad volumétrica de enzimas lacasas. Las tres cepas de Trichoderma fueron capaces de crecer en las condiciones estudiadas. En cuanto al área de la colonia, no se presentaron cambios significativos entre cada una de las cepas, lo mismo ocurrió en la velocidad de crecimiento, aunque se observaron variaciones en el tiempo para colonizar completamente la caja de Petri. La producción de espora disminuyó por la concentración más alta de antraceno (1.6 g) obteniéndose en la cepa CPM-108 (T. harzianum) una concentración de 1.5x106 esporas mL-1, mientras que en el testigo se registraron 2.6x106 esporas mL-1; a los 7 días de colonización completa (CC); en la cepa CPM-121 (T. atroviride) se observaron 6.1x105 esporas mL-1, a los 9 días de colonización completa (CC), mientras que el testigo produjo 1.8x106 esporas mL-1; y en la cepa CPM-113 (T. aggressivum f. aggressivum) se contaron 3.5x105 esporas mL-1, en comparación con el conteo del testigo que fue de 6.0x105 esporas mL-1, a los 12 días de colonización completa (CC). La más alta actividad volumétrica de lacasas se obtuvo en el tratamiento 3 (1.6 g de antraceno + AAS 100 µM) en las cepas CPM-121 de T. atroviride con 0.85 U mL-1 así como en la cepa CPM-113 de T. aggressivum f. aggressivum con 0.63 U mL-1. En la cepa CPM-108 de T. harzianum la actividad fue de sólo 0.04 U mL-1. Los resultados de la presente investigación muestran el potencial de Trichoderma para desarrollar estrategias de biorremediación in situ. _______________ ANTHRACENE EFFECT ON THE IN VITRO GROWTH OF THE GREEN MOLD (Trichoderma spp.) AND ITS POTENTIAL TO DEVELOP IN SITU BIOREMEDIATION STRATEGIES. ABSTRACT: In the present study the effect of anthracene and acetylsalicylic acid (ASA) in the growth in vitro of three strains of different species of Trichoderma (T. harzianum, T. aggressivum f. aggressivum and T. atroviride) isolated from different mushroom substrates was evaluated. Three anthracene concentrations (0.4 g, 0.8 g and 1.6 g) plus acetylsalicylic acid (ASA) 100 µM was added to the culture medium PDA. At the same time, a control consisted in PDA culture medium plus acetylsalicylic acid (ASA) 100 µM was prepared. Growth rate, colony area, spore production and enzymatic activity of laccase were analyzed. The three strains of Trichoderma were able to grow in all conditions. In the area of the colony, no changes between each of the strains or the rate of growth was observed, the only effect that can be seen in the four treatments, it was time to colonize completely the Petri dish. Spore production was affected by the higher concentration of anthracene (1.6 g) in the strain CPM-108 (T. harzianum ) where a concentration of 1.5x106 spores mL-1 was obtained compared to the control with 2.6x106 spores mL-1 in the day 7 of colonization; for the strain CPM -121 (T. atroviride ) 6.1x105 spores mL-1 for the highest concentration of anthracene (1.6 g ) were observed, whereas the control produced 1.8x106 spores mL-1 in the day 9 of colonization, and in the case of the CPM-113 (T. aggressivum f. aggressivum) 3.5x105 spores mL-1 were obtained in the concentration of 1.6 g of anthracene, compared to the control with 6.0x105 spores mL-1 in the day 12 of colonization. The higher volumetric activity of laccases was obtained in treatment 3 (1.6 g anthracene + ASA 100 µM) in the strain CPM-121 of T. atroviride with 0.85 U mL-1 and in the strain CPM-113 of T. aggressivum f. aggressivum with 0.63 U mL-1, while for the strain CPM-108 of T. harzianum the activity was lower with 0.04 U mL-1. The results of this research show the potential of Trichoderma to develop strategies for in situ bioremediation.