Kisspeptina, amamantamiento y efecto macho en la secreción pulsátil y pico preovulatorio de LH durante el periodo postparto de ovejas pelibuey.

Abstract

Se realizaron tres experimentos para evaluar el efecto de la kisspeptina (Kp), el amamantamiento controlado (R) y el efecto macho (M) en la secreción pulsátil y pico preovulatorio de LH; así como, en el comportamiento reproductivo de ovejas durante el anestro postparto. El objetivo del primer estudio fue determinar si el amamantamiento controlado y el efecto macho, como efectos simples o en interacción, mejoran el desempeño reproductivo de ovejas en anestro postparto. Se incluyeron en el estudio 60 ovejas con 1.4±0.15 d de paridas y amamantando a sus crías. El día 6 postparto se formaron 4 grupos: amamantamiento continuo (A; n=15), A más efecto macho (AM; n=15), amamantamiento controlado (R; n=15), y R más efecto macho (RM; n=15). El diseño fue un completamente al azar en arreglo factorial 2x2. A partir del día 35 se empezó la observación para detectar la incidencia de estros en todos los grupos y toda hembra detectada en celo se empadró con monta natural. El efecto macho redujo el tiempo al primer estro en 7 días (p≤0.001), incrementó 47 % las gestaciones (p≤0.030) y aumentó la fecundidad de 0.7 a 1.4 (p≤0.002). El amamantamiento controlado redujo los días al primer estro en 3 (p≤0.016). Se concluyó que el efecto macho y el amamantamiento controlado, como efectos independientes, mejoran el desempeño reproductivo de ovejas en anestro postparto. El segundo experimento se realizó para probar si la aplicación de Kp i.v. incrementaba la secreción pulsátil de LH en ovejas en anestro postparto, con amamantamiento continuo, y si el incremento es mayor que con amamantamiento controlado. Diez días después del parto, se formaron 2 grupos de ovejas: (1) A (n=8) y (2) R (n=8). El día 19, a cada oveja se le colocó un catéter en ambas venas yugulares y después cada una se puso en una jaula individual, con acceso a agua y alimento. El día 20, a las 14:00 h, la mitad de las ovejas de cada grupo recibió 120 µg de Kp, diluida en 3 mL de solución salina y aplicada por infusión continua durante 6 h, mientras que la otra mitad sólo recibió solución salina. El diseño experimental fue factorial 2x2. Se tomaron muestras sanguíneas (4 mL) cada 15 min, desde las 8:00 hasta las 20:00 h, para determinar LH. La frecuencia de secreción de LH antes de la Kp fue similar entre tratamientos (1.50±0.40; p>0.05), pero incrementó a 3.50±0.43 pulsos con la aplicación de Kp (p≤0.0140). Se concluyó que la aplicación de Kp incrementa la secreción pulsátil de LH de manera similar, en ovejas en anestro postparto, con amamantamiento continuo o controlado. El tercer estudio se realizó para evaluar la aplicación de Kp con efecto macho o amamantamiento controlado, en la inducción del pico preovulatorio y la concentración de LH de ovejas en anestro postparto. Se utilizaron 40 ovejas Pelibuey, multíparas, con 10 días de paridas y amamantando a una cría. El día 1 del experimento (día 10 postparto) se formaron 4 grupos de ovejas como sigue: amamantamiento continuo (A; n=8); A con efecto macho (AM; n=12); amamantamiento controlado (R; n=8); R con efecto macho (RM; n=12). El día 9, a cada oveja le fue colocado un catéter en cada vena yugular. Cada grupo de ovejas se dividió en 2 para aplicarles 12 mL de solución salina (S) o 12 mL de S más 480 µg de Kp en 24 h por infusión continua. El diseño experimental fue factorial 2x2x2 (ocho tratamientos). El día 10, a las 14:00 h, se inició la aplicación de la S y Kp mediante una bomba de infusión constante conectada al catéter derecho por una manguera plástica durante 24 h. La tasa de aplicación fue 500 µL h-1 y 20 µg h-1 de Kp, respectivamente. El día 10 y 11 del experimento se tomaron muestras sanguíneas para medir LH cada 2 h, desde 6 h antes de la infusión hasta 6 h después del final de la misma. El 65 % de las ovejas con Kp tuvieron pico preovulatorio. Hubo efecto independiente del factor Kp (p≤0.0005) y la interacción Kp-efecto macho (p≤0.002). La interacción Kp-efecto macho-amamantamiento controlado no fue significativa (p>0.05), pero en el tratamiento RMKp hubo el 100 % de ovejas con pico preovulatorio. Se puede concluir que la Kp induce el pico preovulatorio y el aumento de la concentración de LH en ovejas en anestro postparto; la incidencia incrementa con el efecto macho, pero no con el amamantamiento controlado. _______________ KISSPEPTIN, SUCKLING AND MALE EFFECT IN THE FREQUENCY OF PULSES AND LH SURGE IN POSTPARTUM PERIOD OF PELIBUEY EWES. ABSTRACT: Three experiments were carried out to evaluate effects of kisspeptin (Kp), controlled suckling I and the male effect (M) on the pulsatile secretion and preovulatory surge of LH, as well as the reproductive behavior of postpartum ewes. The objective of the first study was to determine whether or not controlled suckling, the male effect and their interactions, improve the reproductive behavior of ewes during the postpartum interval. According to a 2X2 factorial design, 60 suckling ewes that were 1.4±0.15 d from calving, were randomly allotted on day 6 postpartum to four groups: continuous suckling (A; n = 15), A plus male effect (AM; n = 15), controlled suckling (R; n = 15), R plus male effect (RM; n = 15). At day 35, observations for estrus detection began and all ewes detected in heat were exposed to natural mating. Male effect reduced the interval to first estrus in 7 days (p≤0.001), increased pregnancy rate by 47% (p≤0.030) and improved fecundity from 0.7 to 1.4 (p≤0.002). Controlled suckling reduced the interval to first estrus by 3 days (p≤0.016). It was concluded that male effect and controlled suckling, as independent effects, improve the reproductive performance of postpartum ewes. The second experiment was performed to test whether the i.v. application of Kp increased the pulsatile LH secretion in sheep at postpartum anestrus, with continuous suckling, and if the increase is greater than with controlled suckling. Ten days after calving, ewes were allotted into two groups: (1) A (n = 8) and (2) R (n = 8). On day 19, a catheter was inserted in each of the Jugular veins of all ewes, and then each sheep was placed in an individual cage, with access to water and food. On day 20, at 14:00 h, half of the sheep in each group received 120 μg of Kp, diluted in 3 mL of saline and applied by continuous infusion for 6 h, while the other half received only saline. The experiment was a 2x2 factorial design for repeated measures over time. Blood samples (4 mL) were taken every 15 min, from 08:00 to 20:00 h, to determine LH. The LH frequency of secretion before Kp was similar for all treatments (1.50±0.40, p>0.05), but increased to 3.50±0.43 pulses with the Kp application (p≤0.0140). It was concluded that the application of Kp increases the pulsatile LH secretion in a similar way, in sheep at postpartum anestrus, with continuous or controlled suckling. The third study was carried out to evaluate the application of Kp with male effect or controlled suckling, in the induction of the preovulatory surge and LH concentration of sheep in postpartum anestrus. Forty Pelibuey multiparous ewes that were 10 days from lambing and suckling one lamb. On day 1 of the experiment (10th postpartum day) sheep were allotted into four groups as follows: continuous suckling (A; n = 8); A plus male effect (AM; n = 12); controlled suckling (R; n = 8); R and male effect (RM, n = 12). On day 9, a catheter was inserted in each jugular vein of each sheep. Each group of sheep was divided into two subgroups that received either 12 mL of saline solution (S) or 12 mL of S plus 480 μg of Kp in 24 h by continuous infusion. The experiment was a 2x2x2 (eight treatments) factorial design for repeated samples over time. On day 10, at 14:00 h, application of the S and Kp began by a constant infusion pump connected to the right catheter by a plastic hose. The application rate was 500 μL h-1 and 20 μg h-1 of Kp, respectively. On day 10 and 11 of the experiment, blood samples were taken to measure LH every 2 h, from 6 h before the infusion to 6 h after the end of the infusion. Sixty five per cent of sheep with Kp had preovulatory surge. There was a simple effect of the factor Kp (p≤0.0005), and Kp-male effect interaction (p≤0.002). The Kp, male effect and controlled suckling interaction was not significant (p> 0.05), but in the RMKp treatment there was 100% of sheep with preovulatory surge. It can be concluded that Kp induces preovulatory LH surge in sheep at postpartum anestrus; the incidence increases with male effect, but not with controlled suckling; this same tendency occurs with LH concentration.