Estandarización de técnicas de extracción de ADN en sementales porcinos para evaluar la frecuencia de los genes ESR y PLRL con PCR-RFLP

Abstract

Con el objeto de estandarizar y perfeccionar una técnica de extracción y purificación de ADN a partir de sangre, semen y pelo de porcinos, se obtuvieron muestras de 35 sementales de línea materna Yorkshire y Landrace, en los cuales se valoró la frecuencia de los genes ESR y PRLR mediante PCR-RFLP. La extracción de ADN a partir de sangre y semen únicamente se estandarizaron. El pelo de sementales fue la mejor opción para obtener una alta cantidad y calidad de ADN. Se identificó la frecuencia de dos genes relacionados con prolificidad: Receptor de Prolactina (PRLR) y Receptor de Estrógeno (ESR); en su amplificación se utilizó PCR-RFLP´s y se identificaron los genotipos. En esta identificación se utilizó la enzima Alu I para PRLR y Pvu II para ESR. Los resultados obtenidos, con la muestra de sementales, mostraron que los genotipos asociados a los genes PRLR y ESR no se encontraron en equilibrio Hardy-Weinberg (2, p<0.05). El alelo favorable B de los genes ESR y el favorable A de PRLR mostró frecuencias de 0.14 y 0.21, respectivamente. No ocurrieron animales homocigotos para el genotipo BB en el gen ESR. No hubo diferencias (p>0.05) entre los genotipos asociados con el receptor de la prolactina y el receptor de estrógeno en las características de prolificidad de las piaras, consecuencia probablemente del reducido número de sementales muestreado._______In order to standardizing and perfecting a technique of extraction and DNA purification from blood, semen and hair of pigs, samples of 35 sires of Yorkshire and Landrace maternal lines were obtained, and the frequency of the genes ESR and PRLR were valued using PCR-RFLP. The DNA extraction from just blood and semen were standardized. The hair of the boars technique was the best option to extract and to purify DNA, giving as a result a high amount of quantity and quality. Once extracted the hair DNA the identification of the frequency of two genes related to prolificacy came next: Receptor of Prolactine (PRLR) and Estrogen Receptor (ESR). For the amplification of these genes PCR-RFLP´s was used and the genotypes were identified. In this identification the enzyme Alu I for PRLR and Pvu II for ESR were used. The obtained results, with the sample of boars, showed that the genotypes associated to genes PRLR and ESR were not in Hardy-Weinberg balance (2, p<0.05). The allele favourable B of the ESR and the allele A of the PRLR genes showed frequencies of 0.14 and 0.21, respectively. Homozygote animals for genotype BB in gene ESR did not happen. There were no differences (p> 0.05) between the genotypes associated with prolificacy, the pig estrogen receptor and the pig prolactin receptor, consequence probably of the reduced sampling number of boars.