Aislamiento y caracterización funcional de proteínas del extracto de glándulas salivales (EGS) de tabánidos.

Abstract

Los tabánidos son dípteros hematófagos considerados como una de las mayores plagas que afectan al ser humano y a los animales, ya que son vectores mecánicos de patógenos. En el mundo existen cerca 4290 especies, 207 se han registrado para México y 29 especies para la península de Yucatán, de las cuales en ninguna se han realizado análisis moleculares del extracto de las glándulas salivales. En el presente trabajo se colectaron organismos con redes tipo Malaise en dos sitios de vegetación conservada en el estado de Campeche. Los ejemplares se identificaron mediante la guía de Ibáñez-Bernal (1992). Para el análisis de proteínas se disectaron las especies Tabanus haemagogus y Leucotabanus itzarum, se extrajeron las glándulas salivales y se obtuvieron las proteínas del extracto salival. Las proteínas fueron cuantificadas y analizadas por electroforesis SDS-PAGE, y utilizadas para los ensayos de actividad proteolítica, amilolítica y antimicrobiana. Se obtuvieron un total de 5532 ejemplares distribuidos en nueve especies diferentes, las más dominantes en cada sitio de muestreo fueron Tabanus haemagogus y Diachlorus ferrugatus. El análisis electroforético de las proteínas de T. haemagogus y L. itzarum mostró la expresión diferente, entre especies. En los análisis de actividad biológica se determinó la presencia de serín proteasas y amilasas. La actividad antimicrobiana indicó la presencia de compuestos activos antimicrobianos en el extracto salival. Los resultados indican un amplio repertorio de proteínas en el extracto de las glándulas salivales (EGS) de T. haemagogus y L. itzarum, que se sugiere están relacionadas con la alimentación. _______________ ISOLATION AND FUNCTIONAL CHARACTERIZATION OF PROTEINS FROM SALIVARY GLANDS EXTRACTS (SGE) OF TABANIDS. ABSTRACT: Tabanids are hematophagous dipteran considered as one of main pest that affects humans and animals, because they are mechanical vectors of pathogens agents. In the world there are about 4290 species, in Mexico 207 species have been recorded and 29 species are reported for Yucatan Peninsula, in which none of them have been realized molecular analyzes from the salivary glands extract. In the current study organisms were collected with Malaise traps in two sites with preserved vegetations in the Campeche state. The specimens were identified with Ibáñez-Bernal (1992) guide. For the protein’s analyzes were dissected specimens of Tabanus haemagogus y Leucotabanus itzarum, the salivary glands were extracted and were obtain proteins from salivary extract. The proteins were quantified and analyzed by SDS-PAGE; the proteins obtained were used in proteolytic, amylolytic and antimicrobial activity assays. Collected 5532 specimens belonging to nine different species, the most dominant in every collecting site was Diachlorus ferrugatus and Tabanus haemagogus. Protein electrophoretic analysis of T. haemagogus y L. itzarum showed a differential expression between species. The analyses of biologic activity determined the presence of serin proteases and amylases. The antimicrobial activity tested indicates the presence of antimicrobial active compounds in the salivary extract. The results indicate a wide repertoire of proteins in the salivary gland extract (SGE) of T. haemagogus and L. itzarum suggesting are related with physiological feeding process.